细胞培养操作：

收货处理取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态

传代密度细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养

传代代数可传5代左右；3代以内状态最佳

传代比例传代建议1：2传代，1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿

传代方法

1.吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml培养基终止消化；

3.用吸管轻轻吹打混匀，按1:2比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的培养基至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养；

4.待细胞贴壁后，培养观察；之后每2-3天换液一次新鲜的培养基。

原代淋巴细胞培养体系是一个为体外生长的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳动物的淋巴细胞设计的理想的培养基方案。本体系是一个基于碳酸氢盐的缓冲体系，可以在孵育的5%的CO2的气体环境下维持一个围绕pH7.2的酸碱缓冲体系。本体系是一个无菌的液体混合系统，其中包含必须和非必须氨基酸、维生素、激素、微量元素、IL-2等生长因子和一些其他的有机和无机化合物以及胎牛血清（10%）。本培养体系是基于固定配方配制的液态培养体系，可以为体外培养的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳动物的淋巴细胞提供一个确定适宜的平衡营养环境，并且可以维持淋巴细胞的生存。

运输

放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输

保存方法

基础培养基2℃～8℃，培养添加剂 -20℃，避光，保存12个月。配置好的培养基2℃～8℃保存1-2个月。

体系组成

产品使用

1） 本产品仅能用于科研

2） 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核

3） 本产品未通过用于活体诊断的审核

注意事项

1、收到产品请先检查包装是否完好，如有破损，漏液、浑浊等现象请及时联系我们，培养基冻融后，可能会有少量絮状物析出，不影响产品正常使用。

2、请仔细阅读产品说明书，了解产品使用方法、保存方式、有效期等信息，若因操作失误，保存不当而导致产品出现污染等问题的，责任由客户自行承担。

3、本产品仅能用于科研，培养基中的一些组分对人体有较低的危害性，如有接触立即用大量清水冲洗即可。

细胞培养概念：

细胞培养（cell culture）是指在体外模拟体内环境（无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件等），使之生存、生长、繁殖并维持主要结构和功能的一种方法。

细胞培养可分为原代培养和传代培养；直接从体内获取的组织细胞进行培养为原代培养；当原代培养的细胞增殖达到一定密度后，则需要做再培养，即将培养的细胞分散后，从一个容器以1：2或其他比率转移到另一个或几个容器（同样底面积的容器）中扩大培养，为传代培养，传代培养的累积次数就是细胞的代数。

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