- 人主动脉平滑肌细胞(原代细胞)
- 人主动脉平滑肌细胞(原代细胞)
原代细胞的分离培养:
原代培养即直接从有机体取下细胞、组织或器官,让它们在体外维持与生长。原代培养的特点是细胞或组织刚离开机体,它们的生物性状尚未发生很大的改变,在一定程度上可反映它们在体内的状态,表现出来源组织或细胞的特性, 因此用于药物实验,尤其是药物对细胞活动、结构、代谢、有无毒性或杀伤作用等,是的工具。常用的原代培养法有组织块培养法和消化培养法。
(一)组织块培养法
许多实验室喜欢用组织块培养法进行原代培养,因为方法简单,细胞也较容易生长。尤其是培养心肌,有时还可观察到心肌组织块搏动。细胞从组织块边缘向外长出并铺满培养皿或培养瓶后, 即可进行传代。
1. 设备材料
培养箱、冰箱、超净工作台/无菌间、无菌吸管、离心管、酒精灯、试管架、培养瓶、培养皿、消化液、基础培养液、胎牛血清、Hanks 溶液、双抗试液、剪刀、摄子、小烧杯。
2. 操作步骤
(1) 在无菌条件下,取待培养的组织适量,置入小烧杯中, 以适量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉组织块表面的血污。
(2)用眼科剪将组织块反复剪成0.5~ 1mm3的小块。
(3)再用Hanks 溶液反复漂洗, 直至液体不混浊为止。等组织块下沉,将烧杯倾斜,用小吸管尽量吸除Hanks 溶液。
(4)用含20%灭活血清及双抗溶液(200U/ml、200μg/ml)的培养液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培养液。
(5)用弯头吸管吸取组织小块,均匀地置于培养皿内表面,吸去多余的培养液,各组织小块之间相距0.5cm 为宜。盖好培养皿盖,做好标记, 置37°C 的CO2培养箱内。
(6) 2~4h 后,于超净工作台中,缓缓地向培养皿中加入上述含20%血清及双抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml )的培养液少量,以使组织块浸没在培养液中。
(7)轻轻地将培养皿及组织块移至CO2 培养箱, 如无特殊情况,不必观察。1~2 周后,可观察到细胞从组织块边缘长出,形成生长晕。
(9) 一般说来,若培养液无明显改变, 1 周换液1 次即可。待细胞长满整个培养皿内表面,即可进行传代培养。
人主动脉平滑肌细胞
细胞基本属性:
产品名称
人主动脉平滑肌细胞(原代细胞)
组织来源
主动脉
种属
人
生长特性
贴壁生长
形态特征
成纤维细胞样
英文名称
Human aortic smooth muscle cells
货号
EY-XY3377
规格
5x105cells/T25或1mL冻存管
质量检测:平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光染色为阳性,纯度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等
产品规格:5x105cells/T25细胞培养瓶
培养基:人主动脉平滑肌细胞专用培养基
培养条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
换液频率:每2-3天换液一次
消化液:0.25%
产品货期现货,1周左右
运输方式T25培养瓶/ 顺丰快递(包邮)
供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
背景介绍:
人主动脉平滑肌细胞采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,人主动脉平滑肌细胞分离自主动脉组织;主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为:升主动脉起于左心室,至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓,弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉;在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉,以上为胸主动脉,至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉;髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;
公司正在出售的产品:
血小板膜糖蛋白Ⅱb(CD41)单克隆抗体
大鼠成纤维细胞生长因子13(FGF-13)ELISA试剂盒 ,英文名: FGF-13 ELISA Kit
RatCytochrome-C,Cyt-CELISAKit大鼠细胞(Cyt-C)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Mouse CXC chemokine ligand 16 (CXCL16) ELISA Kit 小鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒
ELISA 小鼠补体C5a(mouse C5a) 48T/96T 进口分装
CLIAKitforLepIgG(RabbitLeptospiraIgG)ELISAKit兔钩端IgG规格:48T/96T
Humancholecystokininoctapeptide,CCK-8ELISAKit人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)免疫试剂盒 Mouse Vascular Endothelial cell Growth Factor C,VEGF-C ELISA kit
类鼻疽伯克霍尔德菌(PP)检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T
HumaeninELISA试剂盒人肾素(Renin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
细胞CDK5/P25激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitIP-10/CXCL大鼠干扰素诱导蛋白10规格:48T/96T
大鼠血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒 ,英文名: PDGF ELISA Kit
人抗类固醇细胞抗体(SCA)ELISA检测试剂盒Humansteroidcellaoaibody,SCAELISAKit 96T/48T
大鼠Ras相关C底物1(RAC1)免疫试剂盒 Rat Ras-related C3 Botulinum Toxin Subsate 1,RAC1 ELISA Kit
肿瘤坏死因子配体超家族成员9抗体
骨形态发生蛋白7抗体
溶质载体转运蛋白家族26成员9抗体
MPV17L蛋白抗体
限制过度增殖相关蛋白EML4抗体
白细胞介素-10受体a抗体
磷酸化MLKL重组兔单克隆抗体
人主动脉平滑肌细胞(原代细胞)CD73单克隆抗体
操作方法:
组织块直接培养法(原代细胞培养实验)
材料与仪器
【动物】选择大约一半足孕时间的胚胎,10-13天龄胚胎含有最大数量的未分化的间质细胞,成纤维细胞可从这些细胞衍生获得。每组小鼠胚胎1个【实验材料】每组的超净台中有以下物品:1.50ml配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS)1瓶;100ml 0.25%瓶;PBS(-)1瓶2.100ml灭菌烧杯2个;3、50ml离心筒2个4、灭菌培养皿1个,细胞培养瓶1个5、1ml,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个6、细胞计数板1块;7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;8、酒精灯1台;
步骤
1) 胚胎的分离。适用哺乳动物(仓鼠、小鼠和大鼠)2)将1-2个胚胎转移至一个小的无菌培养皿中,用新的无菌剪刀小心地绞碎胚胎,用PBS漂洗。3)在无菌状态下,将绞碎的胚胎转移于一50ml的无菌离心筒中,加入40ml 0.25%的无菌,用搅拌棒轻轻搅动。4)在温暖的环境中或置于37°C培养箱中轻轻摇动15分钟。5)让存留的组织块在重力作用下慢慢沉降,将含有悬浮细胞的液体转移至一无菌50ml的离心管中,该管内按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以灭活,。6)加人新鲜溶液(见前述步骤)于含有残留未消化组织块的原来的50ml离心筒中,重复步骤4和5。7)离心混合的细胞悬液,1200r/rain,5分钟,弃上清。8)用新鲜的无菌PBS重悬沉淀的细胞,按步骤7再次离心。9)用PBS反复洗涤细胞直至上清清亮为止。