- AtT-20小鼠垂体瘤细胞
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传代培养操作步骤：
一、贴壁培养
细胞传代培养操作步骤如下：
（1）传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度，当细胞生长密度达到80%~90%时，即可进行传代。
（2）吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次，左右轻轻摇晃后弃掉。
（3）根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的，一般应覆盖整个培养瓶底。
（4）把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化，2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察，当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时，再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落，然后立即加入2倍量的培养液中止消化，使用吸头轻轻吹打，混合均匀，以防消化过度。
（5）吸出所有细胞悬液至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）弃上清，加入适量培养液重悬细胞，轻轻吹打混匀，使细胞均匀分散。
（7）用吸头吸取适量细胞悬液，以适宜的密度接种于新的培养瓶中，补足培养液，摇匀，放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间，甚至进行细胞冻存。
AtT-20小鼠垂体瘤细胞
细胞基本属性：
产品名称
AtT-20小鼠垂体瘤细胞
组织来源
垂体；瘤
种属
小鼠
生长特性
半贴半悬
细胞代数
10代以内
细胞形态
圆形（成串）
生物安全等级 1 冻存条件
无血清冻存液，液氮储存
细胞详细介绍：
细胞别称 AtT20; AtT 20; ATT-20；小鼠垂体瘤细胞
背景介绍;AtT-20细胞细胞系是由小鼠(LAF1)垂体肿瘤细胞培养物中克隆出来的一株促肾上腺皮质激素分泌细胞系。鼠痘病毒阴性。AtT-20细胞生长时不贴壁，而结成细胞团悬浮生长。研究表明，AtT-20细胞能抗脊髓灰质炎病毒。
生物安全等级;1
细胞规格;1x106cells/T25或1mL冻存管
支原体检测;无
保藏机构;ATCC; CCL-89 BCRC; 60244 ECACC; 87021902
培养基;90%RPMI-1640+10%FBS
培养条件;气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
基因表达情况;adrenocorticotropic hormone (ACTH)
染色体;64-66
冻存条件无血清冻存液，液氮储
发货方式复苏发货（免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用） 顺丰快递
供应限制仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
二、悬浮细胞
传代培养操作步骤如下：
一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法（培养液中含有细胞碎片的情况下）。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%（细胞悬液变黄）时，即可进行传代。
（1）严格进行无菌操作，所用一切试剂及耗材均应无菌，且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上，以免细胞发生污染。
（2）所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞，对培养液的要求不一样，必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
（3）胎牛血清对于维持细胞生存，促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定，就应保持用至实验完成。
（4）消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少，或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离，这时的细胞已有损伤或死亡，影响细胞数量和实验进度。
（5）细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够，或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后，应先弹散细胞沉淀，再加入培养液重悬，这样比直接吹打对细胞损伤小，可以提高细胞活率。
（6）吹打细胞时应尽量避免细胞的产生，以免损伤细胞，影响细胞状态（吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生）。
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