- 小鼠角膜基质细胞永生化
- 小鼠角膜基质细胞永生化
小鼠角膜基质细胞永生化
细胞基本属性：
产品名称
小鼠角膜基质细胞永生化（免疫荧光鉴定）
组织来源
实验动物的正常眼组织
种属
小鼠
生长特性
贴壁生长
细胞代数
10代以内
细胞形态
长梭形细胞，不规则细胞
支原体检测 无 冻存条件
无血清冻存液，液氮储存
细胞详细介绍：
细胞鉴定;波形蛋白（Vimentin）免疫荧光染色为阳性，经鉴定细胞纯度高于90%
背景介绍;角膜位于眼球前壁的一层透明膜，约占纤维膜的前1/6，从后面看角膜呈正圆形，从前面看为横椭圆形。角膜厚度各部分不同，中央部薄。角膜分为五层，由前向后依次为：上皮细胞层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮细胞层。 角膜基质为中层结缔组织，透明，角膜基质层中的主要细胞成分是角膜基质细胞，它能合成和分泌纤维，并且对胶原束的排列和平衡都起作用。 该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。
细胞规格;1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测;无
培养基;小鼠角膜基质细胞永生化专用培养基
培养条件;气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件无血清冻存液，液氮储
发货方式复苏发货（免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用） 顺丰快递
供应限制仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
二、悬浮细胞
传代培养操作步骤如下：
一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法（培养液中含有细胞碎片的情况下）。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%（细胞悬液变黄）时，即可进行传代。
（1）严格进行无菌操作，所用一切试剂及耗材均应无菌，且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上，以免细胞发生污染。
（2）所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞，对培养液的要求不一样，必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
（3）胎牛血清对于维持细胞生存，促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定，就应保持用至实验完成。
（4）消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少，或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离，这时的细胞已有损伤或死亡，影响细胞数量和实验进度。
（5）细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够，或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后，应先弹散细胞沉淀，再加入培养液重悬，这样比直接吹打对细胞损伤小，可以提高细胞活率。
（6）吹打细胞时应尽量避免细胞的产生，以免损伤细胞，影响细胞状态（吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生）。
公司正在出售的产品：
Mouse C type naiuretic peptide (CNP) ELISA Kit 小鼠C型尿肽(CNP)ELISA试剂盒
大鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒 ，英文名： SOD ELISA Kit
ELISA 小鼠羟甲基赖(mouse CML) 48T/96T 进口分装
CLIAKitforLDL-IC(MouseLDL-IC)ELISAKit小鼠低密度脂蛋白免疫复合物规格：48T/96T
通用型KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20次
人糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠新生甲状腺素(NN-T4)免疫试剂盒 Mouse Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISA Kit
产品名称 规格
Humaotavirus,RVIgMELISA试剂盒人轮状病毒(RV)IgMELISA试剂盒规格：96T/48T
ELISAKitHO-1小鼠血红素氧合酶1规格：48T/96T
ELISAKitCaN大鼠钙调0酸酶规格：48T/96T
大鼠血小板反应蛋白解整合素金属肽酶1(ADAMTS1)ELISA试剂盒 ，英文名： ADAMTS1 ELISA Kit
Mouse embryonic stem cell line MESPU30 (M30) ELISA Kit 小鼠胚胎干细胞系MESPU30(M30)ELISA试剂盒
MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISAkit 小鼠血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHumanc-junELISAKit人c-jun规格：48T/96T
肿瘤坏死因子受体相关因子2抗体
固生蛋白M抗体
溶质载体转运蛋白家族38成员A5抗体
mScarlet抗体
线粒体蛋白18抗体
白细胞介素-19抗体
磷酸化p21激活激酶6抗体
CD85e抗体
小鼠角膜基质细胞永生化血小板源性生长因子A抗体
传代培养操作步骤：
一、贴壁培养
细胞传代培养操作步骤如下：
（1）传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度，当细胞生长密度达到80%~90%时，即可进行传代。
（2）吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次，左右轻轻摇晃后弃掉。
（3）根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的，一般应覆盖整个培养瓶底。
（4）把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化，2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察，当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时，再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落，然后立即加入2倍量的培养液中止消化，使用吸头轻轻吹打，混合均匀，以防消化过度。
（5）吸出所有细胞悬液至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）弃上清，加入适量培养液重悬细胞，轻轻吹打混匀，使细胞均匀分散。
（7）用吸头吸取适量细胞悬液，以适宜的密度接种于新的培养瓶中，补足培养液，摇匀，放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间，甚至进行细胞冻存。