- 大鼠膝关节滑膜成纤维细胞永生化
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传代培养操作步骤：
一、贴壁培养
细胞传代培养操作步骤如下：
（1）传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度，当细胞生长密度达到80%~90%时，即可进行传代。
（2）吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次，左右轻轻摇晃后弃掉。
（3）根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的，一般应覆盖整个培养瓶底。
（4）把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化，2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察，当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时，再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落，然后立即加入2倍量的培养液中止消化，使用吸头轻轻吹打，混合均匀，以防消化过度。
（5）吸出所有细胞悬液至离心管内，1000rpm/min离心3~5min。
（6）弃上清，加入适量培养液重悬细胞，轻轻吹打混匀，使细胞均匀分散。
（7）用吸头吸取适量细胞悬液，以适宜的密度接种于新的培养瓶中，补足培养液，摇匀，放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
（8）根据细胞生长状态确定换液或传代时间，甚至进行细胞冻存。
大鼠膝关节滑膜成纤维细胞永生化
细胞基本属性：
产品名称
大鼠膝关节滑膜成纤维细胞永生化
组织来源
膝关节滑膜组织
种属
大鼠
生长特性
贴壁生长
细胞代数
10代以内
细胞形态
铺路石状细胞，不规则细胞样
支原体检测 无 冻存条件
无血清冻存液，液氮储存
细胞详细介绍：
背景简介;滑膜是关节囊的内层，淡红色，平滑闪光，薄而柔润，由疏松结缔组织组成。关节腔内的所有结构，除关节软骨、半月软骨板以外,即便是通过关节腔的肌腱、韧带等均全部为滑膜所包裹。 滑膜分泌滑液，在关节活动中起重要作用。正常滑膜分为两层，即薄的细胞层(内腔层)和血管层(内膜下层)，是血管丰富的关节囊内膜，贴附于非关节面部分，覆盖于关节囊内的骨面上，不在软骨面上，此部分称为边缘区或“裸区"。滑膜呈粉红色，光滑发亮、湿而润滑，有时可见绒毛，内含胶原性纤维。 滑膜细胞有A、B两型。巨噬细胞样A型细胞，表面有丝状伪足、浆膜内陷、囊泡、线粒体、溶酶体、胞浆纤维和高尔基体，具有吞噬功能；B型成纤维样滑膜细胞(FLS) ，有高浓度的内质网结构，是介导 RA 关节破坏的主要细胞。
细胞规格;1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测;无
培养基;原代成纤维细胞培养体系
培养条件;气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃
冻存条件无血清冻存液，液氮储
发货方式复苏发货（免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用） 顺丰快递
供应限制仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主
二、悬浮细胞
传代培养操作步骤如下：
一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法（培养液中含有细胞碎片的情况下）。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%（细胞悬液变黄）时，即可进行传代。
（1）严格进行无菌操作，所用一切试剂及耗材均应无菌，且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上，以免细胞发生污染。
（2）所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞，对培养液的要求不一样，必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
（3）胎牛血清对于维持细胞生存，促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定，就应保持用至实验完成。
（4）消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少，或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离，这时的细胞已有损伤或死亡，影响细胞数量和实验进度。
（5）细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够，或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后，应先弹散细胞沉淀，再加入培养液重悬，这样比直接吹打对细胞损伤小，可以提高细胞活率。
（6）吹打细胞时应尽量避免细胞的产生，以免损伤细胞，影响细胞状态（吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生）。
公司正在出售的产品：
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周期素M2抗体
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