- NCI-H239人非小细胞肺癌细胞
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传代培养操作步骤:
一、贴壁培养
细胞传代培养操作步骤如下:
(1)传代前在倒置显微镜下观察细胞形态和生长密度,当细胞生长密度达到80%~90%时,即可进行传代。
(2)吸掉或倒掉培养瓶内的培养液。加入PBS清洗1~2次,左右轻轻摇晃后弃掉。
(3)根据培养瓶大小向瓶内加入适量含EDTA的,一般应覆盖整个培养瓶底。
(4)把培养瓶放入37℃ CO2培养箱进行消化,2~5min后拿出放在倒置显微镜下进行观察,当发现有70%~80%细胞收缩变圆、细胞间隙变大时,再轻轻拍打培养瓶使剩余细胞脱落,然后立即加入2倍量的培养液中止消化,使用吸头轻轻吹打,混合均匀,以防消化过度。
(5)吸出所有细胞悬液至离心管内,1000rpm/min离心3~5min。
(6)弃上清,加入适量培养液重悬细胞,轻轻吹打混匀,使细胞均匀分散。
(7)用吸头吸取适量细胞悬液,以适宜的密度接种于新的培养瓶中,补足培养液,摇匀,放置于37℃ CO2培养箱中进行培养。
(8)根据细胞生长状态确定换液或传代时间,甚至进行细胞冻存。
NCI-H239人非小细胞肺癌细胞
细胞基本属性:
产品名称
NCI-H239人非小细胞肺癌细胞(STR鉴定正确)
组织来源
肺癌;非小细胞肺癌
种属
人
生长特性
贴壁生长
细胞代数
10代以内
细胞形态
上皮细胞样
支原体检测
无
冻存条件
无血清冻存液,液氮储存
细胞详细介绍:
细胞别称 NCI-H239;人非小细胞肺癌细胞
背景介绍 NCI-H239细胞源于一位51岁患有非小细胞肺癌黑人男性患者的治疗前的肿瘤组织,表达C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erb B、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras、N-ras RNAs;该细胞携带K-ras 12突变;p53基因246位密码子突变ATC→ATG;表达PDGF A和B链的异源mRNA;表达TGFα、TGFβ和EGFR;角蛋白 5、8和18阳性,波形蛋白阳性,神经丝蛋白阴性,脱氢酶阴性;据报道,在软琼脂中该细胞形成克隆的效率为9.7%。
细胞规格 1x106cells/T25或1mL冻存管
培养基 RPMI-1640+10%FBS+1%双抗
培养条件 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件无血清冻存液,液氮储
发货方式复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递
供应限制仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主
二、悬浮细胞
传代培养操作步骤如下:
一般实验室中悬浮细胞传代方法分为直接传代法和离心传代法(培养液中含有细胞碎片的情况下)。当在显微镜下观察到悬浮细胞已经长满至80%~90%(细胞悬液变黄)时,即可进行传代。
(1)严格进行无菌操作,所用一切试剂及耗材均应无菌,且须在无菌超净工作台中紫外照射30min以上,以免细胞发生污染。
(2)所用培养液必须适宜细胞生存和生长。来源于不同动物种类、组织类型的细胞,对培养液的要求不一样,必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。
(3)胎牛血清对于维持细胞生存,促进细胞生长起着关键作用。可根据文献或预实验选择合适的胎牛血清。一旦确定,就应保持用至实验完成。
(4)消化细胞时应避免消化时间过短导致消化不收集到的细胞数量少,或消化时间过长导致细胞成团块样絮状游离,这时的细胞已有损伤或死亡,影响细胞数量和实验进度。
(5)细胞离心的时候应避免离心力过小收集的细胞数量不够,或离心力过大对细胞产生损伤。离心后的细胞沉淀弃去上清后,应先弹散细胞沉淀,再加入培养液重悬,这样比直接吹打对细胞损伤小,可以提高细胞活率。
(6)吹打细胞时应尽量避免细胞的产生,以免损伤细胞,影响细胞状态(吹打过程中残留部分液体在吸头内可以减少气泡的产生)。
公司正在出售的产品:
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CL-0408NEC(人食管癌细胞)5×106cells/瓶×2 人组织因子(TF)ELISA 试剂盒 Goat Anti-Chicken IgG/AP 碱性0酸酶(AP)标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
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HUVEC Growth Medium 2single donor Pellet #N/A > 1 mio.cells 软骨细胞培养基CM 人组织型纤维溶酶激活物(t-PA)ELISA试剂盒 Goat Anti-Chicken IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的羊抗鸡IgG 0.1ml
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NCI-H239人非小细胞肺癌细胞CXCL16 Protein Rat 重组大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 标签) 人白细胞调节素(LR)ELISA 试剂盒 MLH1(Mutl homolog l gene) 错配修复蛋白1抗原 0.5mg
ILT2/CD85j: 细胞表面样转录因子2抗体 PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人肝内胆管上皮细胞培养基 100mL 人白细胞介素4受体(IL-4R)ELISA试剂盒 MUC5AC/Mucin 5AC(Gastric Mucin M1) 胃粘液素抗原 0.5mg
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LILRA3 Others Human 人 ILT6 / LILRA3 人细胞裂解液 (阳性对照) 人白细胞介素25(IL-25)ELISA试剂盒 MTNR1B/MTNR-1B(Melatonin receptor 1B) 褪黑素受体1B抗原 0.5mg