Rat NADPHElisaKit

本试剂仅供研究使用  标本：血清或血浆及相关液体

性能:

1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

原理：

采用双抗体夹心法测定MTHFD2水平。用纯化的MTHFD2抗体包被微孔板，制成固相载体，实验时依次在微孔板中加入样本及标准品，并加入 HRP 标记的 ABP 抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，反复洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，再用硫酸终止反应，转变成黄色。颜色的深浅和样品中的 ABP含量呈正相关。采用酶标仪在 450nm 波长测定吸光度（OD 值），根据标准曲线，计算测试样品中 ABP 浓度。

试剂盒组成：

结果判断与分析:

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的待测物质标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的待测物质含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

公司正在出售的产品：

操作步骤：

1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。

2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准

品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。

注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。

3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul

的待测样本。

4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。

5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。

6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸拍干。

7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。

8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。

9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。