商品属性：

背景：

IL-6是急性期反应的有效诱导剂。IL-6的快速产生有助于感染和组织损伤期间的宿主防御，但是IL-6合成过多与疾病病理学有关。在先天免疫应答中，IL-6是通过感染或组织损伤部位的Toll样受体（TLR）识别病原体后，由髓样细胞（例如巨噬细胞和树突状细胞）合成的。在适应性免疫应答中，IL-6是将B细胞分化为分泌免疫球蛋白的细胞（可能）是必需的。IL-6也在CD4+T细胞亚群的分化中起主要作用。IL-6是诱导生发中心形成所需的T滤泡辅助细胞（Tfh）发育的基本因素。IL-6与IL-21一起，可控制Tfh细胞的早期生成，对于有效的针对急性病毒感染的抗体反应至关重要。通过树突状细胞的“簇信号"将原始CD4+T细胞驱动到Th17谱系。骨髓瘤细胞的增殖和浆母细胞的存活也需要IL-6。

标记：

1.将细胞培养基与EdU溶液按照500：1的比例混合，制成2×EdU标记培养基。

2.提前将2×EdU标记培养基预热，然后将150微升2×EdU标记培养基与等体积细胞培养基混合，获得1×EdU溶液。

【注】：①不建议替换全部培养基，这样可能会影响细胞增殖的速度。②配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜。

3.孵育细胞2 h，弃培养基。

【注】：①培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态。②大多数肿瘤细胞以及粘附细胞系均可采用2 h的孵育时间。

4.以1xPBS清洗细胞两次，每次5 min, 以除去未掺入DNA的EdU残留。

【注】：对于贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。

实验步骤：

1. 将细胞以 104-105 个细胞/孔的密度接种在 96 孔板 中，加入 100μL 培养基，含或不含待测化合物。在 CO2 培养箱中在 37℃ 下培养细胞 24 小时。

2. 向板中加入 10μL 不同浓度的待测物质。

3. 在培养箱中将培养板培养适当时间（如 6、12、24 或 48 小时）。

4. 向板的每个孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要将气泡引入孔中。

5. 将平板在培养箱中孵育 1-4 小时。

6. 在读板之前，在定轨振荡器上轻轻混匀。

7. 使用酶标仪测量 450nm 处的吸光度。

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