商品属性：

背景：

IFN-γ，也称为IFNG，属于I I型干扰素家族的一种分泌的蛋白质。 IFN-γ主要由自然杀伤性T细胞（NK）产生。NK细胞作为天然免疫应答的组成部分，一旦抗原特异性免疫产生，CD4和CD8细胞毒性T淋巴细胞效应就会产生。 IFN-γ具有抗病毒，免疫调节和抗肿瘤特性。 IFNG除具有抗病毒活性:外，还具有重要的免疫调节功能，它是巨噬细胞的有效活化因子，对转移的肿瘤细胞具有抗增殖作用，并且可以增强I型干扰素的抗病毒和抗肿瘤作用。IFN-γ单体包含一个有六个α螺旋的核心和一个在C端区域延伸的未折叠序列:组成。 IFN-γ对于抵抗病毒和细胞内细菌感染的先天性和获得性免疫应答以及控制肿瘤至关重要。 IFN-γ的异常表达与许多自身炎症和自身免疫疾病有关。 IFN-γ在免疫系统中的重要性部分源于其直接抑制病毒复制的能力，重要的是源于其免疫刺激和免疫调节作用。

标记：

1.将细胞培养基与EdU溶液按照500：1的比例混合，制成2×EdU标记培养基。

2.提前将2×EdU标记培养基预热，然后将150微升2×EdU标记培养基与等体积细胞培养基混合，获得1×EdU溶液。

【注】：①不建议替换全部培养基，这样可能会影响细胞增殖的速度。②配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜。

3.孵育细胞2 h，弃培养基。

【注】：①培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态。②大多数肿瘤细胞以及粘附细胞系均可采用2 h的孵育时间。

4.以1xPBS清洗细胞两次，每次5 min, 以除去未掺入DNA的EdU残留。

【注】：对于贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。

实验步骤：

1. 将细胞以 104-105 个细胞/孔的密度接种在 96 孔板 中，加入 100μL 培养基，含或不含待测化合物。在 CO2 培养箱中在 37℃ 下培养细胞 24 小时。

2. 向板中加入 10μL 不同浓度的待测物质。

3. 在培养箱中将培养板培养适当时间（如 6、12、24 或 48 小时）。

4. 向板的每个孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要将气泡引入孔中。

5. 将平板在培养箱中孵育 1-4 小时。

6. 在读板之前，在定轨振荡器上轻轻混匀。

7. 使用酶标仪测量 450nm 处的吸光度。

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