产品背景：

重组人可溶性RANK配体又称核因子受体激活剂kappa-B 配体、骨保护素配体、TNFSF11、TRANCE、OPGL 和 CD254，在多种细胞中表达，包括成骨细胞、成纤维细胞、活化的 T 细胞和骨髓基质细胞，也能够与诱饵受体OPG相互作用。 TNFSF11 参与许多基本的生物过程，例如调节T 细胞和树突状细胞之间的相互作用，T 细胞依赖性免疫反应的调节和增强恶性肿瘤体液高钙血症中的骨吸收。 TNFSF11还增强了树突状细胞刺激初始T 细胞的增殖能力。

产品特点：

更简单：无需抗原抗体反应，基于小分子化学反应的检测方法简单高效，反应仅需要几分钟。

更灵敏：无需抗体，检测染料仅BrdU抗体的1/500，很容易扩散，即便是单个增殖细胞也能准确检测。

更快速：无需过夜，省却了抗原抗体反应的复杂繁琐步骤，完成整个检测周期仅需2.5小时。

更准确：无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)，可有效避免变性带来的样品损伤，确保细胞核边缘清晰完整。

更兼容：对样品几乎无损伤，更容易与多种抗体或荧光蛋白同时标记，能够同时检测细胞其他性状特征

实验步骤：

1.细胞培养

（以6孔板为参考，其他培养孔可根据实验需要进行适当调整。）每孔1x10^5-3x10^6细胞接种于6孔板中，培养至正常生长阶段。

注：细胞接种量，可根据细胞大小、生长速度、以及实验处理周期等调整。

2.细胞干预或者处理

（选做）可以根据实验需要对细胞进行药物或者其他刺激干预处理。

3.细胞共孵育培养

根据预实验结果，用细胞培养基按比例稀释溶液，或者按比例在孔板培养液中加入适量的溶液与细胞共同孵育，同时设置不添加组作为阴性对照组。每孔加入配制的稀释后的培养液共同孵育2h，去除旧培养液。

注意事项：

1.由于使用96孔板进行检测，如果你的细胞要养48 h或更长，建议不要吝啬96-孔板的四周边孔，这32个边孔不能使用，建议加入灭菌PBS以饱和中间64个孔的水分。因为细胞培养过程中，边孔的水分蒸发很快，培养液及里面的药物会出现浓缩现象，细胞的状况就复杂了。

2.溶剂在低温情况下会凝固，使用前请室温放置或20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。

3.一般4ºC避光保存两周内有效，保存在-20度长期保存，避免反复冻融，小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解，尤其当变为灰绿色时就不能再用了。

4.Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以37℃水浴孵育以促进溶解，并且必须在全部溶解并混匀后使用。

5.孵育时，须避光。

6.有致癌性，用的时候小心，有条件带那种透明的簿膜手套。配成的需要无菌，对菌很敏感。

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