- 重组小鼠/大鼠血管内皮生长因子165 VEGF165
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商品属性:
产品名称
重组小鼠/大鼠血管内皮生长因子165 VEGF165
英文名称
Mouse/Rat VEGF165 protein
规格
5 μg/20 μg/100 μg/1 mg
货号
EY-01X8692
运输条件
蓝冰运输
用途
仅供科研研究实验
背景:
血管内皮生长因子 165(VEGF165)是一种强效的生长和血管生成细胞因子,属于 VEGF 家族,包括 VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E 和 PIGF。VEGF165 是一种丰富的糖基化细胞因子,由两条相同的 165 个氨基酸链组成。VEGF165 在胚胎血管生成、血管生成和神经发生中发挥着重要作用。
标记:
1.将细胞培养基与EdU溶液按照500:1的比例混合,制成2×EdU标记培养基。
2.提前将2×EdU标记培养基预热,然后将150微升2×EdU标记培养基与等体积细胞培养基混合,获得1×EdU溶液。
【注】:①不建议替换全部培养基,这样可能会影响细胞增殖的速度。②配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜。
3.孵育细胞2 h,弃培养基。
【注】:①培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态。②大多数肿瘤细胞以及粘附细胞系均可采用2 h的孵育时间。
4.以1xPBS清洗细胞两次,每次5 min, 以除去未掺入DNA的EdU残留。
【注】:对于贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。
实验步骤:
1. 将细胞以 104-105 个细胞/孔的密度接种在 96 孔板 中,加入 100μL 培养基,含或不含待测化合物。在 CO2 培养箱中在 37℃ 下培养细胞 24 小时。
2. 向板中加入 10μL 不同浓度的待测物质。
3. 在培养箱中将培养板培养适当时间(如 6、12、24 或 48 小时)。
4. 向板的每个孔中加入 10μL CCK-8 溶液。小心不要将气泡引入孔中。
5. 将平板在培养箱中孵育 1-4 小时。
6. 在读板之前,在定轨振荡器上轻轻混匀。
7. 使用酶标仪测量 450nm 处的吸光度。
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