- 超氧阴离子生化检测试剂盒
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规格
货号
超氧阴离子生化检测试剂盒
100管/96样 50管/48样
EY-01S162
测定意义:
生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用,但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用,导致机体细胞和组织代谢异常,从而引起多种疾病。
测定原理:
超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-在对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,根据A530值可以计算样品中O2-含量。
需自备的仪器和用品:
天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、氯仿和蒸馏水。
试剂一:液体×1瓶,室温保存。
试剂二:液体×1瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×2瓶,-20℃保存。临用前加入22mL试剂二,现配现用。
试剂四:液体×1支,4℃保存。
1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心20min,取上清置冰上待测。
2、细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);16000g, 4℃离心20min,取上清液置冰上待测。
3、血清等液体:直接测定。
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超氧阴离子生化检测试剂盒
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棉花立枯菌 酒酵母 支/瓶
(1)按照蛋白浓度计算
活性单位定义:25℃中每毫克蛋白每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。
ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(Cpr×V样)÷T
=1608×△÷Cpr
(2)按照样本质量计算
活性单位定义:25℃中每克组织每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。
ADH (nmol/min/g鲜重) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(W×V样÷V样总)÷T
=1608×△A÷W
(3)按细胞数量计算
活性单位定义:25℃中每104个细胞每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。
ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反总×109)÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T
=1608×△A ÷细胞数量
(4)按液体体积计算
活性单位定义:25℃中每毫升血清每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。
ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷V样÷T
=1608×△A
ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光径,1 cm;V反总:反应体系总体积,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;V样:加入反应体系中上清液体积,100μL=0.1 mL;T:反应时间,1min。