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- 维生素B6检测试剂盒的组成和操作要点说明
- 点击次数:494 更新时间:2022-01-06
- 维生素B6检测试剂盒的检测原理:试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中呈正相关。用酶标仪测定吸光度(OD值),计算样品浓度。维生素B6检测试剂盒的组成:(1)结合物及标本的稀释液;(2)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为吐温20磷酸缓冲盐水;(3)酶标记的抗原或抗体(结合物);(4)酶的底物;(5)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);(6)已包被抗原或抗体的固相载体。维生素B6检测试剂盒的操作要点:1)标本的采取和保存:可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定,有些则需经预处理。大部分ELISA检测均以血清为标本;2)试剂的准备:所需试剂、蒸馏水、去离子水、自配的缓冲液;3)加样:一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。4)保温:ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育。5)洗涤:洗涤的方式除某些ELISA仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种。6)显色和比色:显色是ELISA中的一步温育反应,此时酶催化无色的底物生成有色的产物。比色前应先用洁净的吸水纸拭干板底附着的液体,然后将板正确放入酶标比色仪的比色架中。仪器准备为酶标仪。7)结果判断:分定性判定和定量判定。