SK-MES-1人肺鳞癌细胞培养操作说明：

1)对于常温运输的细胞，收到细胞后，检查是否有运输问题，即细胞培养瓶或管是否破损，细胞培养液是否溢出。若没有运输问题，请75%酒精消毒后，保留封口膜，放入细胞培养箱中静置。严格检查培养箱的参数：温度，湿度和CO2浓度。细胞静置时间一般为6-12小时后，细胞状态稳定后，即可开始后续操作。选用正确的细胞培养体系，A2780(人卵巢癌细胞)严格按照说明书的培养条件进行培养。条件允许，培养的前三天内做细胞拍照记录，通过邮件发送给我们做及时状态跟踪。

2)对于干冰运输的细胞，请取出冷冻管后，须立即放入37C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。然后将其复苏培养，次日更换培养液。

3) 在细胞复苏及培养过程中，务必保持无菌操作环境，使用前对超净工作台进行紫外灯照射消毒至少30分钟，并穿戴好实验服、手套及口罩。复苏后的细胞需用新鲜预热的培养基轻轻吹打均匀，避免产生气泡，随后接种至已预热的培养皿或培养瓶中，细胞密度控制在适宜范围内，以保证良好的生长状态。

4) 定期检查细胞生长情况，包括形态学观察、贴壁情况及培养基颜色变化。若培养基变黄或细胞密度过高，应及时更换新鲜培养基或进行传代培养。传代时，采用适当的胰酶消化时间，避免过度消化导致细胞损伤，同时控制传代比例，维持细胞活力。

5) 在进行任何药物处理、基因编辑或细胞功能实验前，建议设立对照组，以准确评估实验效果。对照组细胞应与实验组细胞在相同条件下培养，仅不施加实验因素。此外，记录实验过程中的关键步骤、时间点和观察结果，为后续数据分析提供可靠依据。

6) 考虑到细胞培养的长期性和稳定性，建议定期冻存细胞，以保留细胞株的遗传特性和生物学功能。冻存前，选择生长状态良好的细胞，按照标准冻存程序进行，确保细胞在液氮中长期保存后的复苏率和活性。

7) 最后，所有细胞培养相关的废弃物，包括培养基、废液、使用过的耗材等，均需按照实验室生物安全规定进行处理，防止交叉污染和潜在的环境风险。通过严格遵守上述操作说明，可以确保SK-MES-1人肺鳞癌细胞培养的成功率和实验结果的可靠性。